熒光顯微鏡通常需要在黑暗的環境下操作,才能對標本的圖案進行鑒別,該設備操作簡單,檢測快速,能夠很好的用于活體檢測,和微生物新城代謝的變化過程,使用熒(ying)光顯(xian)微(wei)鏡之前要詳細(xi)閱(yue)讀說明書,進入實驗室后打開設備等待一定時間(jian)后再開始工(gong)作,這樣才能減(jian)少(shao)眼(yan)睛的傷害,下面(mian)是詳細(xi)介紹(shao)。
一、熒光顯微鏡(jing)的特點
1、它以紫(zi)外(wai)光(guang)(guang)(guang)(guang)或(huo)蘭(lan)紫(zi)單色光(guang)(guang)(guang)(guang)激發標本的(de)熒(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)。因紫(zi)外(wai)光(guang)(guang)(guang)(guang)是(shi)不(bu)可見光(guang)(guang)(guang)(guang),故由標本發出的(de)熒(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)與(yu)背景反差(cha)很大。熒(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)顯(xian)微(wei)鏡通常是(shi)在黑暗的(de)背景下觀察彩色圖象的(de),而普通顯(xian)微(wei)鏡是(shi)在亮的(de)背景下觀察較暗的(de)樣(yang)品的(de)。熒(ying)光(guang)(guang)(guang)(guang)顯(xian)微(wei)鏡的(de)對比(bi)度(du)約為(wei)普通顯(xian)微(wei)鏡的(de)一百倍,因此可觀察到用(yong)普通顯(xian)微(wei)鏡看不(bu)到的(de)結構和細節。
2、用肉眼或普通(tong)顯(xian)微鏡觀察(cha)經熒(ying)光(guang)色(se)(se)素染色(se)(se)的(de)(de)樣品時,只可(ke)看到(dao)整(zheng)個標(biao)本僅以同(tong)一顏色(se)(se)著(zhu)色(se)(se)。而用熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡觀察(cha)時,標(biao)本會(hui)發出(chu)(chu)染色(se)(se)色(se)(se)素特有(you)的(de)(de)熒(ying)光(guang),呈現(xian)出(chu)(chu)標(biao)本的(de)(de)彩色(se)(se)圖案,易于鑒別,可(ke)減(jian)輕(qing)眼睛的(de)(de)疲勞(lao)。
3、用熒光色素染(ran)色,方(fang)法簡(jian)單,制作標(biao)本容易(yi),有利于快速工作。
4、用于(yu)染色的(de)(de)熒(ying)光(guang)色素只要很低(di)的(de)(de)濃度就能發出明亮的(de)(de)熒(ying)光(guang),一(yi)般對機體無毒(du),故(gu)有利(li)于(yu)活體觀察,如研(yan)究功(gong)能器官的(de)(de)變化過程和細微結(jie)構,某些代謝過程的(de)(de)變化等。
5、利用(yong)熒(ying)光還有(you)助于(yu)分析物(wu)質的化學成分。例(li)如,組(zu)織中有(you)些(xie)重要成分能與藥物(wu)起作用(yong)而發(fa)熒(ying)光,拒(ju)此(ci)可鑒定(ding)它們的存(cun)在或定(ding)位。
二、熒(ying)光顯微(wei)鏡使用注意(yi)事項
1、嚴格按照熒(ying)光顯微鏡說明書要求進行(xing)操作(zuo),不(bu)要隨意改變程序。
2、熒光顯微(wei)鏡應在暗(an)室中進行檢查(cha)。進入暗(an)室后,接上電源,點(dian)燃超(chao)高壓汞燈5~15min,待光源發(fa)出(chu)強光穩定后,眼睛完全(quan)適應暗(an)室,再開始觀察標本(ben)。
3、防止紫(zi)外(wai)線對(dui)眼(yan)睛的損害(hai),在調整光源時應戴(dai)上(shang)防護眼(yan)鏡。
4、檢查時間每次(ci)以1~2h為宜,超(chao)(chao)過90min,超(chao)(chao)高壓汞燈發光強度逐漸下(xia)降,熒(ying)光減弱(ruo);標本受紫外線照射3~5min后(hou),熒(ying)光也明顯減弱(ruo);所以,更多不得超(chao)(chao)過2~3h。
5、熒光顯微(wei)鏡光(guang)(guang)源壽命有限,標本應(ying)集中(zhong)(zhong)檢查,以節省(sheng)時間,保護光(guang)(guang)源。天(tian)(tian)熱(re)(re)時,應(ying)加電扇散熱(re)(re)降溫,新(xin)換燈(deng)泡應(ying)從開始就記錄(lu)使用時間。燈(deng)熄滅后(hou)欲再用時,須待燈(deng)泡充分冷(leng)卻后(hou)才能點(dian)燃。一天(tian)(tian)中(zhong)(zhong)應(ying)避免數次點(dian)燃光(guang)(guang)源。
6、標本(ben)染色后立即觀察(cha),因時間(jian)久了熒光(guang)(guang)會逐(zhu)漸減(jian)弱(ruo)。若(ruo)將標本(ben)放在聚(ju)乙烯塑(su)料袋中保存,可延緩(huan)熒光(guang)(guang)減(jian)弱(ruo)時間(jian),防止封裱劑(ji)蒸(zheng)發(fa)。
7、熒(ying)光亮(liang)度的(de)判(pan)斷標(biao)準:一般分(fen)為四級,即“-”表示(shi)(shi)(shi)無或可(ke)見(jian)微弱熒(ying)光。“+”表示(shi)(shi)(shi)僅能見(jian)明確可(ke)見(jian)的(de)熒(ying)光。“++”表示(shi)(shi)(shi)可(ke)見(jian)有明亮(liang)的(de)熒(ying)光。“+++”表示(shi)(shi)(shi)可(ke)見(jian)耀眼的(de)熒(ying)光。