在熒光顯微鏡(jing)中,熒(ying)(ying)光(guang)(guang)光(guang)(guang)源(yuan)裝置是提供(gong)一(yi)(yi)定波(bo)長的(de)激發(fa)光(guang)(guang)使標本受激發(fa)射熒(ying)(ying)光(guang)(guang),再通過顯微鏡(jing)的(de)物鏡(jing),B鏡(jing)系統使熒(ying)(ying)光(guang)(guang)圖象放大以供(gong)觀察,因此,一(yi)(yi)般(ban)來說,任何顯微鏡(jing)都可(ke)以用于熒(ying)(ying)光(guang)(guang)顯微術。
濾色系統是熒光顯微鏡的重要部分,它由激發濾片(**相(xiang)片)和抑制濾片(pian)(DI二濾只)所(suo)組成。前(qian)者(zhe)(zhe)提(ti)供(gong)一定波(bo)長(chang)范圍的(de)激(ji)發光(guang)(guang),后者(zhe)(zhe)提(ti)供(gong)相應(ying)波(bo)長(chang)范圍的(de)熒光(guang)(guang)。其玻(bo)片通常(chang)用有(you)色玻(bo)璃組成。其型號各國均不相同。
熒(ying)光顯微鏡激發濾片根據光源和熒光色突的特點,可分為露外光激發濾片,紫氏光激發濾片和紫外藍光激發濾片。熒光顯微鏡所需激發濾片的厚度,主要根據所用顯微鏡激發方式而定,暗場熒光顯微術要求激發濾片薄一些,明場時則要求厚一些,因為使用暗場時激發光不會按進入物鏡,另外還得考慮標本情況和目的性,基本原則是以獲得明亮的熒光相更好的背景襯托為準。
熒光(guang)顯微(wei)鏡抑制濾片的選擇,主要根據激發濾只而定。其原則是以完全吸收激發光為目的,透過任何可見光(完全互補)以保護眼睛不受紫外光的刺激和損害。為與激發濾片相對應,抑制濾片也可分為:紫外光抑制濾片、紫藍光抑制濾片和紫外驗光抑制濾址。
上面介紹了(le)熒光顯微(wei)鏡的濾色系統后,再來(lai)了(le)解下熒光顯微(wei)鏡的照明選(xuan)擇(ze)根據什么(me)來(lai)考慮(lv)。
熒光(guang)(guang)顯微鏡的照明可根據(ju)聚光(guang)(guang)器的構造和(he)激發光(guang)(guang)的波長按以下(xia)三點考慮(lv):
①從熒光像的反差要求來(lai)看,UV激發暗(an)場聚(ju)光器照(zhao)明更好。
②以像的亮度(du)來考慮,BV激發濾光片暗場觀察效率更(geng)高。
③UV激(ji)發濾光片暗場觀察和BV激發暗場聚(ju)光器照明的特性,可(ke)看(kan)作介于這兩種照明方法之(zhi)間,但前者濾光片暗場的性質較強(qiang),顯示(shi)圖像較明亮,反差(cha)小;后者因保留暗場光路的性質,故顯示圖像較暗,而反差有所改善。當實際使用熒光顯微鏡時,應采用更適合標本要求的照明法進行觀察。
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