倒置(zhi)熒光顯微鏡是利(li)用一(yi)個高(gao)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)效率的(de)點(dian)光(guang)(guang)(guang)源，經過濾(lv)色(se)系(xi)統發(fa)(fa)出一(yi)定波(bo)長(chang)的(de)光(guang)(guang)(guang)作為(wei)激(ji)發(fa)(fa)光(guang)(guang)(guang)、激(ji)發(fa)(fa)標本內的(de)熒(ying)光(guang)(guang)(guang)物質(zhi)發(fa)(fa)射出各種不(bu)同顏(yan)色(se)的(de)熒(ying)光(guang)(guang)(guang)后，再(zai)通過物鏡和目鏡的(de)放大(da)進(jin)行(xing)觀察。這樣(yang)在強烈的(de)對襯(chen)背(bei)景下(xia)，即使熒(ying)光(guang)(guang)(guang)很微弱也易辨認，敏感性(xing)高(gao)，主(zhu)要用于細胞結構和功能(neng)以(yi)及化學成分等的(de)研究。

倒置熒光顯微鏡(jing)的作用有兩個：一是吸收和阻擋(dang)激發光進(jin)入目鏡、以(yi)免干擾(rao)熒(ying)光和損(sun)傷(shang)眼睛；二是選(xuan)擇(ze)并讓特異的熒光透(tou)過，表現(xian)出專一(yi)的熒光色彩。兩種(zhong)濾光片要(yao)配合(he)使用。

倒置熒光顯微(wei)鏡就其光路來分有兩種

①透射式熒光顯微鏡。激發光源是通過聚光鏡穿過標本材料來激發熒光的。常用暗視野集光器，也可用普通集光器，調節反光鏡使激發光轉射和旁射到標本上.這是比較舊式的熒光顯微鏡。其優點是低倍鏡時熒光強，而缺點是隨放大倍數增加其熒光減弱.所以對觀察較大的標本材料較好。

②落射式熒光顯(xian)微鏡。這是近代發展起來的新式熒光顯微鏡，與上面不同處是激發光從物鏡向下落射到標本表面，即用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡。光路中需加上一個雙色束分離器，它與光鈾呈45度角，激發光被反射到物鏡中，并聚集在樣品上，樣品所產生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發光同時進入物鏡，反回到雙色束分離器，使激發光和熒光分開，殘余激發光再被阻斷濾片吸收。如換用不同的激發濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的組合插塊，可滿足不同熒光反應產物的需要。此種熒光(guang)顯微鏡的優點是視野照明均勻，成像清晰，放大倍數愈大熒光愈強。

倒置熒光顯微鏡使用方法

①打開燈源，超高壓汞燈要預熱幾分鐘才能達到很亮點。

②透射式熒光顯微鏡需在燈源與聚光器之間裝上所要求的激發濾片，在物鏡的后面裝上相應的阻斷濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的插塊。

③用低倍鏡觀察，根據不同型號熒(ying)光顯微鏡(jing)的調節裝置，調整光源中心，使其位于整個照明光斑的中央。

④放置標本片，調焦后即可觀察。使用中應注意：末裝濾光片不要用眼直接觀察，以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標本時，要用無熒光的特殊油鏡;高壓汞燈關閉后不能立即重新打開，需經5分鐘后才能再啟動，否則會不穩定，影響汞燈壽命。