我們要知道熒光顯微鏡的構造既是主要包括哪些核心“配件”。

熒光顯微(wei)鏡主(zhu)要(yao)包含或者說(shuo)可以(yi)簡化(hua)為熒(ying)光(guang)(guang)(guang)光(guang)(guang)(guang)源（激(ji)光(guang)(guang)(guang)、LED、汞(gong)燈(deng)、白(bai)激(ji)光(guang)(guang)(guang)超連續譜光(guang)(guang)(guang)源等）、熒(ying)光(guang)(guang)(guang)濾(lv)色塊(kuai)（不同Chanel通道）、熒(ying)光(guang)(guang)(guang)成像所(suo)需(xu)的相機、以(yi)及顯微鏡(jing)主(zhu)體（物鏡(jing)）幾(ji)個部分(fen)。

具(ju)體過(guo)(guo)程(cheng)為(wei)，當單色或寬光(guang)譜的(de)(de)光(guang)（白激(ji)光(guang)、LED、汞(gong)燈等(deng)(deng)）經過(guo)(guo)前方的(de)(de)filter選出(chu)不同(tong)的(de)(de)通(tong)道，再經過(guo)(guo)二向分(fen)色鏡(jing)（短波(bo)長(chang)(chang)反(fan)(fan)射，長(chang)(chang)波(bo)長(chang)(chang)通(tong)過(guo)(guo)）到(dao)(dao)物鏡(jing)ZUI后(hou)到(dao)(dao)達樣品，由于熒光(guang)樣品都是(shi)常見的(de)(de)下轉換的(de)(de)熒光(guang)材料如DAPI、GFP、RFP等(deng)(deng)，即(ji)短波(bo)長(chang)(chang)激(ji)發長(chang)(chang)波(bo)長(chang)(chang)。ZUI后(hou)激(ji)發出(chu)的(de)(de)熒光(guang)再次經過(guo)(guo)二向色鏡(jing)（短反(fan)(fan)長(chang)(chang)通(tong)）以及另(ling)一片(pian)filter（將雜(za)光(guang)濾掉(diao)）ZUI終到(dao)(dao)達成像系統即(ji)相機或眼睛(jing)。

然后，了解了熒光顯微鏡的光路的特點的基礎，我們就可以分析為什么熒光顯微鏡需要校正。

熒光(guang)成像(xiang)(xiang)是一(yi)個復雜的(de)(de)(de)(de)(de)系統，除了(le)需要(yao)以(yi)上一(yi)些(xie)核心配件的(de)(de)(de)(de)(de)聯(lian)(lian)動和配合(he)外，為了(le)拍出更好(hao)的(de)(de)(de)(de)(de)效果(guo)，光(guang)路(lu)中(zhong)不(bu)(bu)可避免的(de)(de)(de)(de)(de)要(yao)加(jia)入不(bu)(bu)同的(de)(de)(de)(de)(de)透鏡(jing)、針孔等等，甚至是不(bu)(bu)同物鏡(jing)的(de)(de)(de)(de)(de)取(qu)舍。但(dan)是這些(xie)不(bu)(bu)同配件件的(de)(de)(de)(de)(de)聯(lian)(lian)動隨著(zhu)時間的(de)(de)(de)(de)(de)拉長不(bu)(bu)可能總是那么好(hao)，光(guang)源的(de)(de)(de)(de)(de)功率、物鏡(jing)完好(hao)程度、或者光(guang)路(lu)中(zhong)元器件位置的(de)(de)(de)(de)(de)輕微改變，抑或載物臺的(de)(de)(de)(de)(de)略微不(bu)(bu)平都(dou)會ZUI終反應(ying)到成像(xiang)(xiang)效果(guo)上，所以(yi)理論上應(ying)該定期評(ping)估顯微鏡(jing)的(de)(de)(de)(de)(de)成像(xiang)(xiang)質量進行(xing)校正，尤其是對強度有(you)要(yao)求的(de)(de)(de)(de)(de)實驗更該如此(ci)。

而(er)且據我了解，當下國內的(de)(de)(de)一些(xie)平臺也(ye)在做(zuo)類似的(de)(de)(de)工作，不過大家用的(de)(de)(de)很普遍的(de)(de)(de)是熒光beads（熒光微球）來進(jin)行測試評(ping)估。