這種(zhong)操作是(shi)可以(yi)實現的,但具體到你的這個設計方(fang)案(an),可能(neng)實現不了。先說典型怎么實現:你先至少需要一臺研究級熒光顯微鏡,這是因為研究級熒光顯微(wei)鏡可以搭配汞燈或者寬光譜大功率LED光(guang)源MG-100、四通道LED光源MG-120等寬光譜燈箱,光源可(ke)以同(tong)時發射出(chu)多(duo)個激發波長。
然(ran)后你需要配一個雙(shuang)(shuang)通(tong)(tong)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)激(ji)(ji)發(fa)(fa)塊,比如(ru)FISH常用的BG雙(shuang)(shuang)通(tong)(tong)激(ji)(ji)發(fa)(fa)塊,這種激(ji)(ji)發(fa)(fa)塊能(neng)同(tong)時通(tong)(tong)過B藍色和G綠色兩(liang)(liang)種激(ji)(ji)發(fa)(fa)波(bo)段,然(ran)后實現(xian)兩(liang)(liang)個通(tong)(tong)道熒(ying)(ying)(ying)光(guang)同(tong)時發(fa)(fa)射(she),直接形成(cheng)雙(shuang)(shuang)色熒(ying)(ying)(ying)光(guang),就不用切(qie)換激(ji)(ji)發(fa)(fa)塊了。
然后來(lai)說題主說的情況,ZUI大激發波長差不多,那么你可能不需要研究級的熒光顯微(wei)鏡,由無限遠光學顯微鏡升級數顯熒光模塊的簡易熒光顯微鏡就夠你激發了,不能外接燈箱。
簡易(yi)熒光顯微鏡,利(li)用(yong)整合的(de)數顯熒光模(mo)塊提供激(ji)發光源和配套的(de)激(ji)發塊,不能外(wai)接(jie)燈箱,因此難以實現雙通激(ji)發,但(dan)BGU等(deng)單(dan)通道(dao)激(ji)發都是沒(mei)有任何(he)毛病的(de),效果一(yi)樣很好(hao),很多醫院和科研機構也在(zai)使用(yong)。
難(nan)點在于(yu)發(fa)射(she)(she)波長,發(fa)射(she)(she)波長通常(chang)指染(ran)(ran)料的(de)(de)發(fa)射(she)(she)峰值(zhi),在發(fa)射(she)(she)峰值(zhi)的(de)(de)前后都會(hui)有(you)一(yi)個光譜范圍屬(shu)于(yu)發(fa)射(she)(she)波長,如果兩個染(ran)(ran)料的(de)(de)發(fa)射(she)(she)峰值(zhi)并沒有(you)差太(tai)遠,實際的(de)(de)發(fa)射(she)(she)光就很容易重(zhong)疊(die),肉(rou)眼或(huo)(huo)者(zhe)顯(xian)微相機無法區分這種情(qing)況(kuang),你(ni)可能需要(yao)有(you)個積分器(qi)或(huo)(huo)者(zhe)光譜儀才(cai)好辦。
而且回到激發塊上,如果兩個發射光差很多,那么簡易熒光顯微鏡可能也搞不了,你可能需要定制一個特殊的熒光模塊來做簡易熒光顯微鏡,或者用研究級寬場熒光,然后定制一個特殊的激發塊裝上去,比如,DAPI+Fura2,需(xu)要(yao)U的激(ji)發(fa)濾光片,B和G雙通的發射濾光片。
綜上,我感(gan)覺不樂觀,因為發射(she)峰(feng)值不是相差很遠的情(qing)況下(xia),發射(she)光很大概(gai)率會出現重疊,肉眼(yan)和相機(ji)都無(wu)法區(qu)分這種光譜相近的光,就好比365nm和390nm都是紫外(wai),但你不用積分(fen)球(qiu)、光譜儀是很(hen)難區分(fen)兩者的。