熒光是一種物理現象，其中特定的化合物在被另一種顏色的光照射后很快就會發出特定顏色的光。在本文中，我們簡要介紹了熒光物理學和現代熒光顯微鏡的設計要點。我們在實際意義上進一步討論了熒光染料以及了解它們的激發和發射光譜的重要性。除了熒光串擾引起的假陽性結果問題外，還討論了單熒光和多熒光應用中的適當過濾。

熒光是一種物理現象，其中特定的化合物在被另一種顏色的光照射后很快就會發出特定顏色的光。在本文中，我們簡要介紹了熒光物理學和現代熒光(guang)顯(xian)微鏡的設計要點。我們在實際意義上進一步討論了熒光染料以及了解它們的激發和發射光譜的重要性。除了熒光串擾引起的假陽性結果問題外，還討論了單熒光和多熒光應用中的適當過濾。

為了(le)使樣品適合(he)熒光顯(xian)微鏡(jing)檢查(cha)，它要是熒光的。有幾種創建熒光樣品的方法；主要技術是用熒光染料標記，或者在生物樣品的情況下，熒光蛋白的表達。或者，可以使用樣品的固有熒光。在生命科學中，熒光顯微鏡(jing)是一種強大的工具，它允許對樣本進行特異性和敏感的染色，以檢測蛋白質或其他感興趣的分子的分布。因此，生物樣品的熒光染色技術多種多樣。

熒光顯(xian)微(wei)鏡生物(wu)科學(xue)中(zhong)的(de)應用

生(sheng)物熒光

許(xu)多熒(ying)光(guang)染(ran)料是為(wei)一系列生(sheng)物(wu)分(fen)子設計的。其(qi)(qi)中一些是本質上具(ju)有熒(ying)光(guang)并結合感興趣的生(sheng)物(wu)分(fen)子的小分(fen)子。其(qi)(qi)中主要的例子是核酸染(ran)色(se)劑，如DAPI和(he)Hoechst和 DRAQ5 和 DRAQ7，它們都與DNA的(de)小溝結(jie)(jie)合(he)，從而標(biao)記細(xi)胞(bao)核。其他是藥物(wu)、毒素或結(jie)(jie)合(he)特定細(xi)胞(bao)結(jie)(jie)構(gou)并已用熒光(guang)(guang)報(bao)告分子(zi)衍生的(de)肽(tai)。這(zhe)類(lei)熒光(guang)(guang)染料的(de)一(yi)個主要例子(zi)是鬼筆環(huan)肽(tai)，它用于染色肌動蛋(dan)白。哺乳動物(wu)細(xi)胞(bao)中的(de)纖(xian)維(wei)。一(yi)種新的(de)肽(tai)，稱(cheng)為膠(jiao)原雜(za)交肽(tai)，也可以與(yu)熒光(guang)(guang)團結(jie)(jie)合(he)，用于染色變性的(de)膠(jiao)原纖(xian)維(wei)。使用結(jie)(jie)合(he)纖(xian)維(wei)素或果(guo)膠(jiao)的(de)染色劑或染料對(dui)植物(wu)細(xi)胞(bao)壁進行(xing)染色。對(dui)能(neng)夠(gou)對(dui)植物(wu)細(xi)胞(bao)進行(xing)活體成像(xiang)的(de)高特異性熒光(guang)(guang)探針的(de)探索仍在進行(xing)中。

免(mian)疫熒光

免疫(yi)熒光(guang)是(shi)一種利用抗(kang)體(ti)與(yu)(yu)其抗(kang)原的高度特(te)異性結(jie)合來標記細胞內的特(te)定(ding)蛋(dan)白(bai)質(zhi)或其他分子的技術。用對目標分子特(te)異的一抗(kang)處理樣品。熒光(guang)團可以(yi)直接與(yu)(yu)一抗(kang)偶(ou)聯。或者，可以(yi)使(shi)用與(yu)(yu)第Y抗體特異性結(jie)合的熒光團偶聯的第E抗體。例如(ru)，在識別微管蛋白的(de)小鼠(shu)中產生的(de)一抗與(yu)用熒光團衍(yan)生的(de)二(er)抗結合(he)的(de)抗小鼠(shu)二(er)抗可用于(yu)標記細胞中的(de)微管。

熒光(guang)蛋白(bai)

現代對遺傳學(xue)的理(li)解和可用于(yu)修(xiu)飾 DNA 的技術使科學(xue)家(jia)能(neng)夠對蛋(dan)(dan)白質(zhi)進行基(ji)(ji)因修(xiu)飾，從而也攜帶熒光蛋(dan)(dan)白報告(gao)基(ji)(ji)因。在(zai)生物樣(yang)品中，這允許(xu)科學(xue)家(jia)直接(jie)使感興(xing)趣(qu)的蛋(dan)(dan)白質(zhi)發熒光。然后可以直接(jie)跟(gen)蹤蛋(dan)(dan)白質(zhi)的位置，包括在(zai)活(huo)細胞中。