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熒光顯微鏡的介紹之熒光顯微鏡的明暗場成像原理和濾色片選用

作者:admin 瀏覽量:193 來源:本(ben)站 時(shi)間(jian):2023-03-01 11:51:09

信息摘要:

熒(ying)光(guang)顯微鏡根(gen)據襯度形成的機制,對散射(she)吸收像可以有(you)兩種成像方式(shi):

熒光(guang)顯微鏡根據襯(chen)度形成的機制,對散射(she)吸收像(xiang)可(ke)以有(you)兩種(zhong)成像(xiang)方(fang)式:

明場成像法(BFI):選用單一透射束形成的衍射襯(chen)度像,亮(liang)背景上的暗圖(tu)形像,像清晰。物鏡光闌的孔越小,明場像的襯(chen)度越大。

暗場(chang)成(cheng)像(xiang)(xiang)法(fa)(DFI):選(xuan)用單(dan)一衍(yan)射束形成(cheng)的衍(yan)射襯度像(xiang)(xiang),暗背景上的亮圖(tu)形像(xiang)(xiang),像(xiang)(xiang)有畸變。這(zhe)種暗場(chang)成(cheng)像(xiang)(xiang)法(fa)可以提高圖(tu)像(xiang)(xiang)的襯度。

熒光顯微鏡.png

熒光顯微鏡濾色片的選用:
濾色片是熒光顯微鏡的關鍵部件, 在熒光顯微鏡中按其功能可分為激發濾色片和截止濾色片兩類。激發濾色片的功能是從光源中分析出所需的特定光譜, 以激發標本產生熒光。截止濾色片的功能是僅把標本上發出的熒光透過成像, 而將其它光阻擋不參與成像, 一般激發濾色片安置在緊靠光源, 而截止濾色片在物鏡與目鏡之間。

目(mu)前使(shi)用較(jiao)多的(de)(de)濾色片(pian)是色玻璃和(he)干(gan)(gan)涉(she)濾色片(pian), 色玻璃大都屬寬(kuan)(kuan)波(bo)帶(dai)濾色片(pian), 透過波(bo)段(duan)寬(kuan)(kuan), 透過率(lv)(lv)隨(sui)厚度而降低(di), 價格相對(dui)低(di)廉(lian)。由(you)于色玻璃與空氣的(de)(de)界面(mian)上, 約有4% 光線被反(fan)射(she)掉, 玻片(pian)愈多, 光能(neng)(neng)損失愈大, 限(xian)制了它的(de)(de)使(shi)用性能(neng)(neng)。干(gan)(gan)涉(she)濾色片(pian)的(de)(de)出現(xian), 可(ke)按需要制成(cheng)能(neng)(neng)透過或(huo)截(jie)止一定波(bo)段(duan)的(de)(de)濾色片(pian), 從而促使(shi)熒光顯微術的(de)(de)進展, 現(xian)代技術上已能(neng)(neng)對(dui)某波(bo)段(duan)的(de)(de)透射(she)率(lv)(lv)或(huo)反(fan)射(she)率(lv)(lv)進行(xing)控制。

熒光顯微(wei)鏡根據結構組成部分可以分成兩種不同類型的熒光顯微鏡:
透射式熒光顯微鏡,它和普通光學顯微鏡類似,光源是從鏡座出發經過聚光鏡到達樣品激發熒光后通過物鏡,*后到達目鏡。
落射式熒光顯微鏡,也是*常見的熒光顯微鏡,它的光源是通過物鏡落到樣品上,激發熒光以后再發射回物鏡,*后到達目鏡。
透射式熒光顯微鏡(jing)和落射式熒光顯微鏡,它們的光源都要經過激發濾色鏡過,濾掉一部分的可見光,但是它們的光源來源相反,透射式熒光顯微鏡光源來源于下方,而落射式熒光顯微鏡則是上方,具有分光鏡的功能,可以觀察透明和不透明的被檢物體,突破透射式熒光顯微鏡的局限性,因此隨著技術不斷進步,落射式熒光顯微鏡逐漸替代落射式熒光顯微鏡。

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