熒光顯微鏡是(shi)利用一個高發光效率的(de)(de)點光源,經過濾色系統(tong)發出(chu)一定波長的(de)(de)光(如紫(zi)外光3650入或紫(zi)藍光4200入)作為激(ji)發光、激(ji)發標(biao)本內的(de)(de)熒(ying)光物(wu)質發射出(chu)各種不同顏色的(de)(de)熒(ying)光后,再(zai)通過物(wu)鏡和目鏡的(de)(de)放大(da)進行觀察。這樣在強烈的(de)(de)對(dui)襯背景下,即使熒(ying)光很微弱也易辨認,敏感性高,主要用于細胞結(jie)構和功能以(yi)及化學成分等的(de)(de)研究。
熒光(guang)顯微鏡的基本構造是由普通光學顯微鏡加上一些附件(如熒光光源、激發濾片、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎上組成的。熒光光源——般采用超高壓汞燈(50一200W),它可發出各種波長的光,但每種熒光物質都有一個產生很強熒光的激發光波長,所以需加用激發濾片(一般有紫外、紫色、藍色和綠色激發濾片),僅使一定波長的激發光透過照射到標本上,而將其他光都吸收掉。每種物質被激發光照射后,在很短時間內發射出較照射波長更長的可見熒光。熒光具有專一性,一般都比激發光弱,為能觀察到專一的熒光,在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片。
它的作用有二(er):一是(shi)吸收和阻擋激發光(guang)(guang)(guang)進(jin)入目鏡、以免于擾熒(ying)光(guang)(guang)(guang)和損(sun)傷眼睛,二(er)是(shi)選擇并讓特異的熒(ying)光(guang)(guang)(guang)透過,表現出專(zhuan)一的熒(ying)光(guang)(guang)(guang)色彩。兩種濾(lv)光(guang)(guang)(guang)片要選擇配合使用。