顯微(wei)鏡是(shi)細胞(bao)培養(yang)及相關衍生實(shi)驗(yan)中(zhong)非常重(zhong)要的儀器。目前，市場上有各種類型的顯微(wei)鏡。對于剛剛入行的小白來(lai)說，選(xuan)擇(ze)一個符(fu)合需求、適用的是(shi)一個挑戰。這里我們(men)將介紹倒置顯微(wei)鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡的原(yuan)理供您選擇。　　

1.倒置顯微鏡(jing)

與普(pu)通顯(xian)(xian)微(wei)鏡(jing)相(xiang)比，倒(dao)置(zhi)顯(xian)(xian)微(wei)鏡(jing)的(de)(de)物(wu)(wu)鏡(jing)和照明(ming)聚光系統以(yi)載物(wu)(wu)臺(tai)為軸顛倒(dao)，物(wu)(wu)鏡(jing)在載物(wu)(wu)臺(tai)下方，照明(ming)系統在載物(wu)(wu)臺(tai)上方。采用(yong)這種結構，可以(yi)顯(xian)(xian)著擴(kuo)大照明(ming)聚光系統與載物(wu)(wu)臺(tai)之間的(de)(de)有效距離，便于(yu)放置(zhi)較厚(hou)的(de)(de)待觀(guan)察器具，如培養(yang)皿、細胞培養(yang)瓶等。

由(you)于(yu)倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)觀察的材料一(yi)般(ban)是培養的細胞，透明(ming)度高，結構反差(cha)不明(ming)顯(xian)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)往往配有相(xiang)差(cha)物鏡(jing)，實際上(shang)構成了(le)倒(dao)置(zhi)相(xiang)差(cha)顯(xian)微鏡(jing)。

2.相差顯微鏡

在(zai)相差顯(xian)微(wei)鏡(jing)檢(jian)查時(shi)，只有當(dang)(dang)透(tou)射光(guang)的(de)波長(顏色(se))和(he)振(zhen)幅(亮度)隨周圍介(jie)質發生(sheng)明顯(xian)變化時(shi)，才能用(yong)肉眼(yan)分辨出視場中(zhong)的(de)樣品(pin)。當(dang)(dang)照明光(guang)通(tong)過無色(se)透(tou)明的(de)物(wu)體時(shi)，透(tou)射光(guang)的(de)波長和(he)振(zhen)幅沒有明顯(xian)變化，尤其是振(zhen)幅幾(ji)乎(hu)不變。因此，當(dang)(dang)用(yong)普通(tong)的(de)光(guang)學(xue)顯(xian)微(wei)鏡(jing)觀察時(shi)，很難分辨這種物(wu)體的(de)結構。需要通(tong)過固(gu)色(se)、染色(se)等(deng)物(wu)理化學(xue)方(fang)法，使樣品(pin)的(de)透(tou)射光(guang)與背(bei)景(jing)在(zai)波長或(huo)振(zhen)幅上發生(sheng)變化，即在(zai)顏色(se)和(he)亮度上存在(zai)差異，從(cong)而進行(xing)鑒別。

相(xiang)差(cha)(cha)顯微(wei)鏡不同于(yu)普通的光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)學顯微(wei)鏡，裝置中有(you)四(si)個必不可(ke)少的部件：相(xiang)差(cha)(cha)顯微(wei)鏡(內部有(you)相(xiang)位(wei)板)、帶環形光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)闌(lan)的轉盤聚光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)鏡、軸(zhou)對準望遠鏡和(he)(he)綠色濾光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)片。關鍵是(shi)相(xiang)位(wei)差(cha)(cha)物鏡和(he)(he)環形光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)闌(lan)，更(geng)具體(ti)地說(shuo)是(shi)相(xiang)位(wei)板和(he)(he)環形光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)闌(lan)。光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)源產(chan)(chan)生的光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)通過環形光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)闌(lan)和(he)(he)聚光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)器形成環形光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)錐，照(zhao)射(she)(she)待檢物體(ti)，產(chan)(chan)生直射(she)(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)和(he)(he)衍射(she)(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)。兩者(zhe)分別(bie)經過相(xiang)位(wei)板上的共(gong)軛(e)面(mian)和(he)(he)補償面(mian)，產(chan)(chan)生干涉(she)。共(gong)軛(e)面(mian)和(he)(he)補償面(mian)上的鍍膜可(ke)以使(shi)直射(she)(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)和(he)(he)衍射(she)(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)的相(xiang)位(wei)分別(bie)滯(zhi)后1/4.導致干涉(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)的振(zhen)幅(fu)加強和(he)(he)減弱(ruo)，從而產(chan)(chan)生亮反差(cha)(cha)和(he)(he)暗(an)反差(cha)(cha)。從而即使(shi)被(bei)(bei)檢測的物體(ti)沒(mei)有(you)被(bei)(bei)染色也(ye)可(ke)以被(bei)(bei)清(qing)楚地區分。

3.熒光顯微鏡

熒光顯微(wei)(wei)鏡(jing)用(yong)于(yu)研究(jiu)細胞內物質(zhi)的(de)(de)(de)(de)吸收和(he)運輸(shu)，化學(xue)物質(zhi)的(de)(de)(de)(de)分(fen)布(bu)和(he)定位等。熒光顯微(wei)(wei)鏡(jing)采(cai)用(yong)發(fa)光效(xiao)率(lv)高的(de)(de)(de)(de)點光源，通過濾色系統發(fa)出一(yi)定波長的(de)(de)(de)(de)光(紫外(wai)光365nm或(huo)紫外(wai)藍光420nm)作為激發(fa)光，激發(fa)標本(ben)中的(de)(de)(de)(de)熒光物質(zhi)發(fa)出各種顏色的(de)(de)(de)(de)熒光，再通過物鏡(jing)和(he)目鏡(jing)的(de)(de)(de)(de)放大觀(guan)察。在這樣強烈(lie)對(dui)比的(de)(de)(de)(de)背(bei)景(jing)下，即(ji)使熒光微(wei)(wei)弱，也容(rong)易識別(bie)，靈敏度高。主要(yao)用(yong)于(yu)細胞結構、功能(neng)和(he)化學(xue)成(cheng)分(fen)的(de)(de)(de)(de)研究(jiu)。