顯(xian)微鏡是(shi)細(xi)胞培(pei)養(yang)及相關衍生實(shi)驗中非(fei)常(chang)重要的(de)(de)儀器。目(mu)前，市(shi)場上有各種類型的(de)(de)顯(xian)微鏡。對于(yu)剛剛入行的(de)(de)小(xiao)白來說，選擇一(yi)(yi)個(ge)符(fu)合需求、適用的(de)(de)是(shi)一(yi)(yi)個(ge)挑戰。這里我們將介紹(shao)倒置顯(xian)微鏡、相(xiang)差顯微鏡、熒光(guang)顯微鏡的(de)原理供您選擇。　　

1.倒置顯微鏡

與(yu)(yu)普通顯微鏡相比，倒置顯微鏡的(de)物(wu)(wu)鏡和照(zhao)明聚光系統(tong)以載(zai)物(wu)(wu)臺(tai)為(wei)軸顛(dian)倒，物(wu)(wu)鏡在載(zai)物(wu)(wu)臺(tai)下方(fang)，照(zhao)明系統(tong)在載(zai)物(wu)(wu)臺(tai)上方(fang)。采用(yong)這種結(jie)構，可以顯著擴大照(zhao)明聚光系統(tong)與(yu)(yu)載(zai)物(wu)(wu)臺(tai)之間的(de)有效(xiao)距離，便于(yu)放置較厚的(de)待觀(guan)察器具，如培養(yang)皿、細胞培養(yang)瓶等(deng)。

由于倒(dao)置顯(xian)微鏡觀察的材料一般是培(pei)養的細(xi)胞，透明(ming)度高(gao)，結構反差(cha)不明(ming)顯(xian)，倒(dao)置顯(xian)微鏡往(wang)往(wang)配有相差(cha)物鏡，實際上構成(cheng)了倒(dao)置相差(cha)顯(xian)微鏡。

2.相差顯微鏡

在相差顯微(wei)鏡檢查時(shi)(shi)，只(zhi)有(you)當(dang)(dang)透(tou)射(she)光(guang)(guang)(guang)的波(bo)(bo)長(chang)(顏(yan)色(se))和振(zhen)幅(fu)(fu)(亮(liang)度)隨周圍介質發(fa)生明顯變(bian)化時(shi)(shi)，才能用肉眼分辨出視場中的樣品。當(dang)(dang)照(zhao)明光(guang)(guang)(guang)通(tong)過無色(se)透(tou)明的物體時(shi)(shi)，透(tou)射(she)光(guang)(guang)(guang)的波(bo)(bo)長(chang)和振(zhen)幅(fu)(fu)沒有(you)明顯變(bian)化，尤其(qi)是振(zhen)幅(fu)(fu)幾乎不(bu)變(bian)。因此，當(dang)(dang)用普通(tong)的光(guang)(guang)(guang)學(xue)顯微(wei)鏡觀察時(shi)(shi)，很難分辨這種物體的結構。需要通(tong)過固色(se)、染色(se)等物理(li)化學(xue)方法，使樣品的透(tou)射(she)光(guang)(guang)(guang)與背(bei)景在波(bo)(bo)長(chang)或振(zhen)幅(fu)(fu)上發(fa)生變(bian)化，即(ji)在顏(yan)色(se)和亮(liang)度上存(cun)在差異，從(cong)而進行鑒別。

相差(cha)顯微(wei)鏡不同于普通(tong)的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)學顯微(wei)鏡，裝置中有(you)四個(ge)必不可少(shao)的(de)(de)(de)(de)部件：相差(cha)顯微(wei)鏡(內(nei)部有(you)相位(wei)(wei)板(ban))、帶環(huan)(huan)形(xing)(xing)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)闌(lan)(lan)的(de)(de)(de)(de)轉盤聚(ju)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)鏡、軸(zhou)對準望遠鏡和(he)(he)(he)綠色濾光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)片。關鍵是相位(wei)(wei)差(cha)物鏡和(he)(he)(he)環(huan)(huan)形(xing)(xing)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)闌(lan)(lan)，更具(ju)體地(di)說是相位(wei)(wei)板(ban)和(he)(he)(he)環(huan)(huan)形(xing)(xing)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)闌(lan)(lan)。光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)源產生的(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)通(tong)過環(huan)(huan)形(xing)(xing)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)闌(lan)(lan)和(he)(he)(he)聚(ju)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)器形(xing)(xing)成環(huan)(huan)形(xing)(xing)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)錐(zhui)，照射(she)待(dai)檢(jian)(jian)物體，產生直射(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)和(he)(he)(he)衍射(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)。兩者分別經過相位(wei)(wei)板(ban)上(shang)的(de)(de)(de)(de)共(gong)(gong)軛面(mian)和(he)(he)(he)補償面(mian)，產生干(gan)涉。共(gong)(gong)軛面(mian)和(he)(he)(he)補償面(mian)上(shang)的(de)(de)(de)(de)鍍膜可以使(shi)直射(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)和(he)(he)(he)衍射(she)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)的(de)(de)(de)(de)相位(wei)(wei)分別滯后(hou)1/4.導(dao)致干(gan)涉光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)的(de)(de)(de)(de)振幅加強和(he)(he)(he)減(jian)弱(ruo)，從而產生亮(liang)反差(cha)和(he)(he)(he)暗(an)反差(cha)。從而即使(shi)被(bei)檢(jian)(jian)測(ce)的(de)(de)(de)(de)物體沒有(you)被(bei)染(ran)色也可以被(bei)清(qing)楚地(di)區分。

3.熒光顯微鏡

熒(ying)光(guang)(guang)顯(xian)微鏡(jing)(jing)用(yong)于研(yan)究細(xi)胞內物質的(de)吸收和(he)(he)(he)運輸，化學物質的(de)分布和(he)(he)(he)定(ding)位等。熒(ying)光(guang)(guang)顯(xian)微鏡(jing)(jing)采用(yong)發(fa)光(guang)(guang)效率高的(de)點(dian)光(guang)(guang)源，通過濾色(se)系統發(fa)出一定(ding)波長的(de)光(guang)(guang)(紫(zi)(zi)外光(guang)(guang)365nm或(huo)紫(zi)(zi)外藍光(guang)(guang)420nm)作為激發(fa)光(guang)(guang)，激發(fa)標本中(zhong)的(de)熒(ying)光(guang)(guang)物質發(fa)出各(ge)種顏色(se)的(de)熒(ying)光(guang)(guang)，再通過物鏡(jing)(jing)和(he)(he)(he)目(mu)鏡(jing)(jing)的(de)放(fang)大觀(guan)察。在這(zhe)樣強烈對(dui)比(bi)的(de)背景下，即使(shi)熒(ying)光(guang)(guang)微弱，也容易識別，靈(ling)敏度(du)高。主要(yao)用(yong)于細(xi)胞結構、功能和(he)(he)(he)化學成分的(de)研(yan)究。