民(min)用和商業照明領域的進展(zhan)讓顯微鏡所用的照明技術也不斷更新。相比于普通光學顯微鏡，熒(ying)光顯微鏡對光源的要求更高。
熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)顯(xian)微鏡的(de)(de)主要原理是(shi)：光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)源的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)經過(guo)激發(fa)片的(de)(de)過(guo)濾，得到激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)；激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)照射到樣(yang)品上，樣(yang)品受(shou)激發(fa)而發(fa)射出熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)；二向分光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)鏡可以同時反射激發(fa)光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)，和透射熒光(guang)(guang)(guang)(guang)(guang)。
有些樣品自身可以發出熒光；更多樣品自身不能發熒光，但是經過染色后，也可以發出熒光。只有對特定波長的入射光，這些染色劑才能發出熒光。因此作為熒光顯微(wei)鏡的光源，首先需要滿足染色劑的波段要求。其次，由于熒光相對于入射光較為微弱，因此光源需要有足夠高的亮度。
常用(yong)的熒光光源(yuan)有(you)汞燈、氙燈、激光和LED。傳(chuan)統光源(yuan)具有(you)如下(xia)特(te)點:
汞燈 | 優(you)點 | 多個譜峰，非相(xiang)干光(guang)(guang)源，價格合理(li)，發光(guang)(guang)表面緊湊 |
汞(gong)燈 | 缺點 | 發(fa)熱過多(duo)，壽(shou)命短，產(chan)生臭氧(yang)，需要激發(fa)片和發(fa)射片，難以調(diao)節 |
氙燈 | 優點 | 寬光譜(pu)，非相干(gan)光源，價格(ge)合(he)理，發光表(biao)面緊湊 |
氙燈 | 缺(que)點 | 發熱過(guo)多，壽(shou)命較(jiao)短，產生臭氧(yang)，需要激發片和(he)發射片，難以調節(jie) |
激光(guang) | 優點(dian) | 單色譜線，每(mei)條(tiao)譜線的功率高，相對長的壽命(ming)，發光表面緊湊(cou) |
激光 | 缺點 | 發(fa)熱(re)過多，價(jia)格高(gao)，相關光源，需要(yao)發(fa)射(she)片，需要(yao)高(gao)電壓，難以(yi)調節 |
相比傳統(tong)光(guang)源(yuan)(yuan)，LED具有諸多優勢。如長(chang)壽命、發熱少、非相關(guan)光(guang)源(yuan)(yuan)、低電壓運行(xing)。在使用上，LED光(guang)源(yuan)(yuan)可以即開即關(guan)，而不(bu)影響(xiang)其(qi)壽命，一通電馬上就能達到全光(guang)強，不(bu)像(xiang)傳統(tong)光(guang)源(yuan)(yuan)那(nei)樣(yang)需(xu)要長(chang)時(shi)間的預熱。
當使用(yong)單色LED時，激發片就(jiu)不是一定需要的了，這樣設計出(chu)來(lai)的熒(ying)光顯(xian)微裝置結構可(ke)以更簡單。如果樣品只有一種熒(ying)光，而且沒有自發熒(ying)光干擾(rao)，那么發射片也可(ke)以省略。
按照“海茲定律”，每經過10 年，LED輸出流明將提升20倍，同時LED的成本價格將降1/10。在這種趨勢下，LED光源成為熒光顯微鏡的主流光源是不可避免的。
