熒光顯微鏡用(yong)于研究化學物(wu)質在(zai)細胞中的吸收、運輸、分布和定(ding)位。被測物(wu)體產(chan)生熒(ying)光(guang)的方式有兩種:自(zi)發(fa)熒(ying)光(guang),紫外線照(zhao)射(she)后(hou)直接發(fa)出熒(ying)光(guang)稱為二次(ci)熒(ying)光(guang),被觀察(cha)物(wu)經熒(ying)光(guang)染料處理后(hou),經紫外光(guang)照(zhao)射(she)后(hou)才能(neng)發(fa)出熒(ying)光(guang)。細胞中的一些(xie)物(wu)質,如(ru)葉綠素,受(shou)到(dao)紫外線照(zhao)射(she)后(hou)會產(chan)生自(zi)發(fa)熒(ying)光(guang)。其他物(wu)質雖然本身沒有熒(ying)光(guang),但用(yong)熒(ying)光(guang)染料或(huo)熒(ying)光(guang)抗(kang)體染色后(hou),可以發(fa)出二次(ci)熒(ying)光(guang)。
熒光(guang)顯微(wei)鏡(jing)(jing)采(cai)用發(fa)光(guang)效率高(gao)的(de)點光(guang)源,發(fa)射(she)一定波長的(de)光(guang)作為激發(fa)光(guang),激發(fa)標本中的(de)熒光(guang)物質(zhi)發(fa)出(chu)各(ge)種顏色的(de)熒光(guang),然后通過物鏡(jing)(jing)和(he)目鏡(jing)(jing)的(de)放大進行觀察。在這樣強的(de)對比背景(jing)下,即使熒光(guang)微(wei)弱,也容易識別,靈敏(min)度高(gao),主要(yao)用于(yu)研究細胞結構功能和(he)化學成分。
熒光顯微鏡怎么選擇才(cai)能不(bu)上當?
熒(ying)光顯微鏡(jing)可分為兩種類型:透射(she)顯(xian)(xian)微鏡和(he)下落顯(xian)(xian)微鏡。前者是原始(shi)的,后者是的。兩種熒(ying)(ying)(ying)光(guang)顯(xian)(xian)微鏡的基本構造(zao)相似(si),主(zhu)要區別如下:透射(she)激發(fa)光(guang)通過標本,整個標本產生熒(ying)(ying)(ying)光(guang),然(ran)后進(jin)入物(wu)鏡,放大(da)倍數越(yue)高(gao),熒(ying)(ying)(ying)光(guang)越(yue)弱(ruo);入射(she)的激發(fa)光(guang)投射(she)到樣品表面,樣品表面產生熒(ying)(ying)(ying)光(guang),然(ran)后熒(ying)(ying)(ying)光(guang)進(jin)入物(wu)鏡。放大(da)倍數越(yue)高(gao),熒(ying)(ying)(ying)光(guang)越(yue)強(qiang),適合高(gao)倍觀察(cha)。
熒光顯(xian)微鏡(jing)的主要(yao)部件有(you)(you)汞燈光(guang)源、激(ji)發(fa)濾(lv)板、分(fen)色鏡(jing)、壓制濾(lv)板、暗場聚光(guang)器等。此外,由于汞燈發(fa)熱(re)(re)嚴重(zhong),大部分(fen)都裝有(you)(you)吸熱(re)(re)過濾(lv)器。有(you)(you)些熒光(guang)顯微鏡(jing)也(ye)有(you)(you)相(xiang)位差物鏡(jing)和(he)環形光(guang)闌,所(suo)以(yi)可(ke)以(yi)進行相(xiang)位差觀察。而熒光(guang)顯微鏡(jing)采用倒(dao)置框(kuang)架,還有(you)(you)倒(dao)置顯微鏡(jing)等等。
此外,上述所有顯微鏡都可以通過安(an)裝CCD組裝成數(shu)字顯微鏡,將顯微鏡看到的物(wu)理圖像轉換成數(shu)模圖像,并使其(qi)在計算機上成像。因此,我們(men)可(ke)以(yi)從傳(chuan)統的普通雙目(mu)觀察到顯示器上的再現來研究微觀領域,從而提高(gao)工作效率(lv)。
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