熒光顯(xian)微鏡(jing)用于研究(jiu)化(hua)學(xue)物質在細(xi)胞中(zhong)的(de)吸收、運輸、分布(bu)和定位(wei)。被測物體產生熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)的(de)方式有兩種:自(zi)發熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang),紫(zi)外(wai)線照(zhao)射后(hou)(hou)(hou)直接發出熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)稱為二(er)次(ci)(ci)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang),被觀察物經熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)染(ran)料處理后(hou)(hou)(hou),經紫(zi)外(wai)光(guang)(guang)(guang)照(zhao)射后(hou)(hou)(hou)才能(neng)發出熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)。細(xi)胞中(zhong)的(de)一些物質,如(ru)葉綠素,受到(dao)紫(zi)外(wai)線照(zhao)射后(hou)(hou)(hou)會產生自(zi)發熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)。其他物質雖然本身沒有熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang),但用熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)染(ran)料或(huo)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)抗體染(ran)色后(hou)(hou)(hou),可(ke)以(yi)發出二(er)次(ci)(ci)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)。
熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)顯微(wei)鏡采用(yong)發(fa)光(guang)(guang)(guang)效率(lv)高的(de)(de)點(dian)光(guang)(guang)(guang)源,發(fa)射一定波(bo)長的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)作為激(ji)發(fa)光(guang)(guang)(guang),激(ji)發(fa)標本中的(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)物質發(fa)出各種顏色的(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang),然后通過(guo)物鏡和(he)目鏡的(de)(de)放大進行(xing)觀(guan)察。在這樣強的(de)(de)對比背(bei)景(jing)下,即使(shi)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)微(wei)弱,也(ye)容(rong)易識別(bie),靈(ling)敏(min)度高,主要用(yong)于研究細胞(bao)結構功能和(he)化學成分。
熒光(guang)顯微鏡怎么(me)選擇才能不(bu)上當(dang)?
熒光顯微鏡可分為兩種類型:透射(she)顯微鏡(jing)(jing)和下落(luo)顯微鏡(jing)(jing)。前者是(shi)原始(shi)的(de),后(hou)者是(shi)的(de)。兩種熒(ying)(ying)光(guang)顯微鏡(jing)(jing)的(de)基(ji)本構造相似,主要區別如(ru)下:透射(she)激發光(guang)通過標本,整個標本產生熒(ying)(ying)光(guang),然(ran)后(hou)進(jin)入(ru)物(wu)鏡(jing)(jing),放(fang)大(da)倍數越高(gao),熒(ying)(ying)光(guang)越弱;入(ru)射(she)的(de)激發光(guang)投射(she)到(dao)樣品(pin)表(biao)面,樣品(pin)表(biao)面產生熒(ying)(ying)光(guang),然(ran)后(hou)熒(ying)(ying)光(guang)進(jin)入(ru)物(wu)鏡(jing)(jing)。放(fang)大(da)倍數越高(gao),熒(ying)(ying)光(guang)越強(qiang),適合高(gao)倍觀(guan)察(cha)。
熒光顯微鏡的主(zhu)要部件有(you)汞燈光(guang)(guang)源、激發(fa)濾板(ban)(ban)、分(fen)色鏡(jing)、壓制(zhi)濾板(ban)(ban)、暗場聚(ju)光(guang)(guang)器等(deng)。此外,由于(yu)汞燈發(fa)熱(re)嚴重,大部分(fen)都裝(zhuang)有(you)吸熱(re)過濾器。有(you)些熒(ying)光(guang)(guang)顯微鏡(jing)也有(you)相位(wei)(wei)差物鏡(jing)和環形(xing)光(guang)(guang)闌,所以可以進行(xing)相位(wei)(wei)差觀(guan)察。而熒(ying)光(guang)(guang)顯微鏡(jing)采(cai)用倒(dao)置框(kuang)架,還有(you)倒(dao)置顯微鏡(jing)等(deng)等(deng)。
此外,上述所有顯微鏡都(dou)可(ke)以通過安裝CCD組(zu)裝(zhuang)成數(shu)字(zi)顯微(wei)鏡,將(jiang)顯微(wei)鏡看到(dao)的(de)物理(li)圖(tu)像轉(zhuan)換成數(shu)模圖(tu)像,并使(shi)其在計(ji)算機(ji)上成像。因此,我們可以從(cong)傳(chuan)統的(de)普通(tong)雙目(mu)觀察(cha)到(dao)顯示器上的(de)再(zai)現(xian)來研究微(wei)觀領域(yu),從(cong)而提高工作效率。
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