熒光顯微鏡是免yi熒光細胞化學的基本工具,由光源、濾板系統和光學系統等主要部件組成。熒光顯微鏡利用(yong)一(yi)定波長的光激發標本發射熒光,通過(guo)物鏡和目鏡系統放大以(yi)觀察標本的熒光圖像。
熒光顯微鏡(jing)多采用200W的超高壓汞燈作光源,它是用石英玻璃制作,中間呈球形,內充一定數量的汞,工作時由兩個電級間放電,引起水銀蒸發,球內氣壓迅速升高,當水銀完全蒸發時,可達50~70個標準大氣壓力,這一過程一般約需5~15min。超高壓汞燈的發光是電級間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發射光量子的結果。它發射很強的紫外和藍紫光,足以激發各類熒光物質,因此,為熒光顯微鏡普遍采(cai)用(yong)。超高壓汞燈也散發大量熱能。因此,燈室要(yao)有良好的散熱條件,工(gong)作環境溫度不(bu)宜太高。
超高(gao)壓(ya)汞(gong)燈(deng)在使(shi)(shi)用(yong)初期不(bu)需(xu)高(gao)電壓(ya)即可(ke)引燃,使(shi)(shi)用(yong)一(yi)些時間后,則(ze)需(xu)要(yao)高(gao)壓(ya)啟動(dong)(dong)(約(yue)為15000V),啟動(dong)(dong)后,維持(chi)工(gong)作電壓(ya)一(yi)般為50~60V,工(gong)作電流約(yue)4A左右。200W超高(gao)壓(ya)汞(gong)燈(deng)的平均(jun)壽命,在每(mei)次(ci)使(shi)(shi)用(yong)2h的情況下(xia)約(yue)為200h,開動(dong)(dong)一(yi)次(ci)工(gong)作時間愈短(duan),則(ze)壽命愈短(duan),如開一(yi)次(ci)只(zhi)工(gong)作20min,則(ze)壽命降低(di)50%。
因此,使用熒光顯微(wei)鏡時(shi)盡量減少啟動次數。燈(deng)(deng)泡在使用(yong)過程中,其光效是逐漸降低的(de)。燈(deng)(deng)熄滅后要(yao)等待冷(leng)卻才能重(zhong)新啟動。點(dian)燃燈(deng)(deng)泡后不(bu)可立即關閉,以免(mian)水銀蒸發不(bu)完全而損壞電(dian)級,一般需要(yao)等15min。由于超高(gao)壓(ya)汞(gong)燈(deng)(deng)壓(ya)力很高(gao),紫外線強烈,因此燈(deng)(deng)泡要(yao)置(zhi)燈(deng)(deng)室(shi)中方(fang)可點(dian)燃,以免(mian)傷害眼睛和發生爆炸時(shi)造成操(cao)作者(zhe)受傷。