倒置熒光顯微鏡現在使用起來需要我們了解一些專業知識和物理知識。一般來說我們不需要了解里面的成像原理，但對于倒置熒光顯微鏡主要部件的作用，當問題出現的時候，我們自己也就能夠“啟動”進行調整。今天我們就來看看倒置熒光顯微鏡的使用包括哪些需要注意的細節，大家也可以關注下。

①正確觀察白光的步驟？

將標本放在載物臺上，打開電源開關；將轉盤聚光器調整到亮視場，再將環形光圈調整到大光圈；從低功耗鏡像開始。

②相位差環中的字母BF/PHL/PH2到底是什么意思？

倒置熒光顯微鏡結合了熒光附件和相差顯微鏡的特點。那么相位差環中的這些字母分別代表：PHL(40.13)，PH1(200.45)，PH2(400.6)，BF代表白光。因此，如果我們觀察熒光，可以選擇前三個差異。所謂相位差可以理解為放大了透明結構，因為細胞本身的內部結構是透明的，所以我們想要觀察細胞內部結構的時候需要用到相位差。

③無論如何調整細焦距螺旋，倒置熒光顯微鏡下的圖像都不清晰。

在這種情況下，鏡頭可能不干凈，因此我們就可以用酒精棉擦拭鏡子。此外，大功率物鏡外還有一個旋鈕，適當轉動這個旋鈕也會使畫面清晰。

④如何正確觀察熒光？

關閉室內燈，打開白光電源和汞燈電源。一般需要提前10分鐘打開汞燈預熱；關閉熒光快門，用低倍鏡找到細胞位置；關閉透光按鈕，打開熒光光路快門，旋轉熒光濾色片轉盤；計算機監視器中的觀察。

熒光光路快門應在后面打開，然后先關閉，這樣可以保護樣品，避免過度的熒光猝滅。

⑤汞燈怎么保養？

汞燈在工作時會散發大量的熱量，所以需要保持室內溫度不要太高，有一個良好的散熱環境。汞燈的工作壽命一般為200小時，但使用時間越短，觀察越快，汞燈的壽命越長。相反，工作時間越短，汞燈壽命降低的越快，所以開關的次數要盡可能減少。

⑥為什么在目鏡下觀察到的圖像只有一半？

出現這種情況的原因是CT回路的調整出現了問題。CT環位于目鏡下方，也叫同軸對準目鏡，有CT/O/S三種參數設置，CT對應瞄準望遠鏡的光路；o對應光路中沒有物體；s對應光路中的擋光板。那么以上情況就是CT環的螺旋位于CT和S參數之間。

⑦白光觀察下的物體為什么這么暗？

環形隔膜沒有向大孔徑開口。環形光闌位于光源和聚光器之間，使光線通過聚光器聚焦在標本上；或者光強調節旋鈕關閉。