倒置熒光顯微鏡現在使用起來需要我們了解一些專業知識和物理知識。一般來說我們不需要了解里面的成像原理，但對于倒置熒光(guang)顯(xian)微(wei)鏡主要部件的作用，當問題出現的時候，我們自己也就能夠“啟動”進行調整。今天我們就來看看倒置熒光顯微鏡的使(shi)用(yong)包括哪些(xie)需要(yao)注意(yi)的細(xi)節(jie)，大家也(ye)可以關注下(xia)。
①正確觀察白光的步驟？
將標本放在載物臺上，打(da)開(kai)電源(yuan)開(kai)關；將轉(zhuan)盤聚光(guang)器調(diao)整到(dao)亮視場，再將環(huan)形光(guang)圈調(diao)整到(dao)大光(guang)圈；從(cong)低功耗鏡(jing)像開(kai)始。
②相(xiang)位差環(huan)中的字母BF/PHL/PH2到底(di)是什么意思(si)？
倒置熒光顯微鏡(jing)結合了(le)熒(ying)光(guang)(guang)附件和相(xiang)差(cha)顯微鏡的(de)(de)特點。那么相(xiang)位差(cha)環(huan)中的(de)(de)這(zhe)些字母分別代表(biao)：PHL(40.13)，PH1(200.45)，PH2(400.6)，BF代表(biao)白光(guang)(guang)。因此，如果我們觀(guan)察熒(ying)光(guang)(guang)，可以(yi)選擇前三(san)個差(cha)異(yi)。所謂相(xiang)位差(cha)可以(yi)理解為放大(da)了(le)透明(ming)(ming)結構(gou)(gou)，因為細(xi)胞(bao)本身的(de)(de)內部(bu)結構(gou)(gou)是透明(ming)(ming)的(de)(de)，所以(yi)我們想要(yao)(yao)觀(guan)察細(xi)胞(bao)內部(bu)結構(gou)(gou)的(de)(de)時候需要(yao)(yao)用到相(xiang)位差(cha)。
③無論如何調整細焦距螺旋，倒置熒(ying)光顯微鏡下的圖像都不清晰。
在這種情(qing)況下，鏡頭可能不干凈，因此我們就(jiu)可以用酒精棉擦拭鏡子。此外(wai)，大(da)功(gong)率物鏡外(wai)還有一個(ge)旋鈕(niu)，適當(dang)轉(zhuan)動這個(ge)旋鈕(niu)也會使畫面清晰。
④如何正確觀察熒光？
關(guan)閉室內燈，打開(kai)白光(guang)(guang)電(dian)源和汞燈電(dian)源。一般(ban)需要提(ti)前10分鐘打開(kai)汞燈預熱；關(guan)閉熒光(guang)(guang)快(kuai)門，用低倍鏡找到細胞位置；關(guan)閉透光(guang)(guang)按鈕，打開(kai)熒光(guang)(guang)光(guang)(guang)路快(kuai)門，旋轉(zhuan)熒光(guang)(guang)濾色片轉(zhuan)盤；計算(suan)機監視器中的觀察。
熒光光路快門(men)應在后(hou)面打開，然后(hou)先(xian)關閉，這樣可以保護樣品，避免(mian)過度的熒光猝(cu)滅。
⑤汞燈怎么保養？
汞燈在(zai)工(gong)作時(shi)會散(san)發(fa)大量的(de)(de)熱(re)量，所(suo)以需要保(bao)持室內溫(wen)度不要太高，有一個良好的(de)(de)散(san)熱(re)環境。汞燈的(de)(de)工(gong)作壽命(ming)一般(ban)為200小時(shi)，但使用時(shi)間越短(duan)，觀(guan)察越快，汞燈的(de)(de)壽命(ming)越長(chang)。相反，工(gong)作時(shi)間越短(duan)，汞燈壽命(ming)降低(di)的(de)(de)越快，所(suo)以開關(guan)的(de)(de)次數要盡可能(neng)減少。
⑥為什么在目鏡下(xia)觀察(cha)到(dao)的圖像只有一(yi)半？
出現(xian)這種情況(kuang)的原(yuan)因是(shi)CT回路的調整出現(xian)了問題。CT環位于目(mu)鏡(jing)下方，也叫同軸對準(zhun)(zhun)目(mu)鏡(jing)，有CT/O/S三種參(can)數設置，CT對應(ying)瞄準(zhun)(zhun)望遠鏡(jing)的光(guang)路；o對應(ying)光(guang)路中沒有物體；s對應(ying)光(guang)路中的擋光(guang)板。那么以上(shang)情況(kuang)就是(shi)CT環的螺旋位于CT和S參(can)數之間。
⑦白光觀察下的物體為什么這么暗？
環形隔膜沒有向(xiang)大孔徑(jing)開口。環形光闌位于光源和(he)聚光器(qi)之間，使光線通過聚光器(qi)聚焦(jiao)在標本上；或者光強調節旋(xuan)鈕(niu)關閉。
