熒(ying)光顯微鏡是利用一個高發光效率的點光源，經過濾色系統發出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發光、激發標本內的熒光物質發射出各種不同顏色的熒光后，再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察。這樣在強烈的對襯背景下，即使熒光很微弱也易辨認，敏感性高，主要用于細胞結構和功能以及化學成分等的研究。隨著技術上不斷進步，熒光顯微鏡被廣泛(fan)用于生(sheng)物(wu)化學(xue)(xue)和生(sheng)命科(ke)學(xue)(xue)。

熒光顯微鏡(jing)標本制作要求：

①載(zai)玻片：載(zai)玻片厚度(du)應在0.8～1.2mm之間，太厚的坡片，一(yi)方(fang)面光(guang)(guang)吸收多，另一(yi)方(fang)面不能使激(ji)發(fa)光(guang)(guang)在標本上(shang)聚集。載(zai)玻片必須光(guang)(guang)潔，厚度(du)均勻(yun)，無明顯自發(fa)熒光(guang)(guang)。有(you)時需用石英玻璃載(zai)玻片。

②蓋玻片(pian)：蓋玻片(pian)厚度在(zai)0.17mm左右，光潔。為(wei)了(le)加強激發(fa)光，也可(ke)用干(gan)涉蓋玻片(pian)，這(zhe)是(shi)一(yi)種特制的(de)表面鍍有(you)若干(gan)層對不同波長(chang)的(de)光起(qi)不同干(gan)涉作用的(de)物質(如(ru)氟化鎂)的(de)蓋玻片(pian)，它(ta)可(ke)以使熒光順(shun)利通過，而反射激發(fa)光，這(zhe)種反射的(de)激發(fa)光女可(ke)激發(fa)標本。

③標(biao)本(ben)：組織切片或(huo)其他(ta)標(biao)本(ben)不(bu)能太厚(hou)，如太厚(hou)激發光大部(bu)分(fen)消(xiao)耗(hao)在標(biao)本(ben)下部(bu)，而物鏡(jing)直接(jie)觀(guan)察到的上部(bu)不(bu)充分(fen)激發。另外，細胞重迭(die)或(huo)雜(za)質掩蓋，影響判斷。

④封裱劑(ji)：封裱劑(ji)常用甘油(you)，必須無自發熒(ying)光，無色(se)透明，熒(ying)光的(de)亮度(du)在pH8.5～9.5時較亮，不易很快褪去(qu)。所以，常用甘油(you)和0.5mol/LpH9.0～9.5的(de)碳酸鹽(yan)緩沖液的(de)等量(liang)混合(he)液作封裱劑(ji)。

⑤鏡油：一般暗視野熒光顯微鏡和用(yong)(yong)油(you)(you)鏡(jing)(jing)觀察(cha)標本時，必(bi)須使用(yong)(yong)鏡(jing)(jing)油(you)(you)，可(ke)使用(yong)(yong)特制的無熒光(guang)鏡(jing)(jing)油(you)(you)，也可(ke)用(yong)(yong)上述甘(gan)油(you)(you)代(dai)替，液體石蠟(la)也可(ke)用(yong)(yong)，只是(shi)折(zhe)光(guang)率(lv)較低(di)，對圖(tu)像質量略有(you)影(ying)響。