熒光顯微(wei)鏡是以(yi)紫外線(xian)為(wei)光(guang)源，用以(yi)照(zhao)(zhao)射被檢物體，使之(zhi)發(fa)出(chu)熒(ying)光(guang)，然(ran)后在顯微鏡下觀察(cha)物體的(de)形狀及其所在位置。主(zhu)要用于研究細胞(bao)內物質的(de)吸收、運輸、化(hua)學物質的(de)分布及定位等。細胞(bao)中(zhong)有(you)些物質，如(ru)葉綠素(su)等，受紫外線(xian)照(zhao)(zhao)射后可發(fa)熒(ying)光(guang)；另(ling)有(you)一些物質本身(shen)雖(sui)不(bu)能發(fa)熒(ying)光(guang)，但如(ru)果(guo)用熒(ying)光(guang)染料或熒(ying)光(guang)抗體染色后，經紫外線(xian)照(zhao)(zhao)射也可發(fa)熒(ying)光(guang)。

熒光(guang)顯微(wei)鏡觀察到的熒光圖像具有形態特征，具有熒光顏色和亮度。在判斷結果時，要結合起來作出的判斷。結果是根據主觀指標，即工人的眼睛來記錄的。隨著科技的發展，客觀指標被用來記錄判斷結果，如使用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但是，這些所記錄的結果也要與主觀判斷相結合。

攝影對(dui)于(yu)記錄熒(ying)光(guang)(guang)(guang)圖(tu)像(xiang)是(shi)非常必要(yao)的。由于(yu)熒(ying)光(guang)(guang)(guang)容(rong)易褪色和減弱(ruo)，因此有必要(yao)對(dui)實時(shi)的結(jie)果進行(xing)記錄。該方法(fa)(fa)與普(pu)通顯微攝影方法(fa)(fa)基本相同。只需使用高(gao)速(su)光(guang)(guang)(guang)敏(min)膜(mo)，如ASA200或以(yi)上(shang)或24。上(shang)面。由于(yu)紫外光(guang)(guang)(guang)對(dui)熒(ying)光(guang)(guang)(guang)的猝(cu)滅效(xiao)應很大，如熒(ying)光(guang)(guang)(guang)標記物FITC等，在紫外光(guang)(guang)(guang)照射(she)30s時(shi)，熒(ying)光(guang)(guang)(guang)亮度(du)下降了50%，因此曝(pu)光(guang)(guang)(guang)速(su)度(du)太慢，無法(fa)(fa)捕捉到熒(ying)光(guang)(guang)(guang)圖(tu)像(xiang)，一般有半自(zi)動或全自(zi)動顯微攝影系統。

下面要為大家介紹的是熒(ying)光顯(xian)微鏡的使用注意事項：

①嚴格按照操作說明書的要求使用熒光顯微鏡，不改變該程序。

②觀(guan)察(cha)應在暗室進行。進入(ru)暗室后(hou)，接通(tong)電源(yuan)，點燃超高壓汞燈5-15分鐘。當光源(yuan)發(fa)出(chu)強光并(bing)穩定下(xia)來時，眼睛有效適應暗室，然后(hou)開始(shi)觀(guan)察(cha)標本。

③為防止紫外線對眼睛造成損害，調節光源時(shi)戴防護(hu)眼鏡。

④每次檢查時(shi)間為1～2h，超(chao)過90min，超(chao)高壓(ya)汞燈的發光強度逐漸降(jiang)低，熒光降(jiang)低；紫(zi)外線照射3～5分(fen)鐘(zhong)后熒光降(jiang)低。因此，不超(chao)過2~3h。

希望上述介紹的內容能夠幫助大家更好的了解熒光(guang)顯微(wei)鏡。下期(qi)分享內容再見！