倒置熒光顯微鏡由熒光(guang)(guang)附件與倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)結(jie)合構成(cheng)的(de),主(zhu)要用于(yu)細(xi)胞等(deng)活體組織的(de)熒光(guang)(guang)、相差觀察(cha)。是為(wei)了適應生物(wu)(wu)學、醫學等(deng)領域中的(de)組織培(pei)養、細(xi)胞離體培(pei)養、浮游(you)生物(wu)(wu)、環境保護、食品檢驗等(deng)顯(xian)微(wei)觀察(cha)。由于(yu)這(zhe)些活體被檢物(wu)(wu)體均(jun)放置在培(pei)養皿(或培(pei)養瓶)中,這(zhe)樣就要求倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)的(de)物(wu)(wu)鏡(jing)和聚(ju)光(guang)(guang)鏡(jing)的(de)工作距(ju)離很長(chang),能(neng)直(zhi)接(jie)對培(pei)養皿中的(de)被檢物(wu)(wu)體進(jin)行(xing)顯(xian)微(wei)觀察(cha)和研(yan)究。因此,物(wu)(wu)鏡(jing)、聚(ju)光(guang)(guang)鏡(jing)和光(guang)(guang)源的(de)位置都顛(dian)倒(dao)過(guo)來(lai),故稱為(wei)"倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡(jing)"。
倒置熒光顯微鏡是近代發展起來的新式熒光顯微鏡,特點是激發光從物鏡向下落射到標本表面,即用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡。光路中需加上一個雙色束分離器,它與光鈾呈45°角,激發光被反射到物鏡中,并聚集在樣品上,樣品所產生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發光同時進入物鏡,反回到雙色束分離器,使激發光和熒光分開,殘余激發光再被阻斷濾片吸收。
倒置熒光顯微鏡有圖像輸出系統,可將傳(chuan)統的光學顯微鏡與(yu)電(dian)腦(nao)計(ji)算機(ji)(數碼相機(ji))通過專業的工業相機(ji)連接(jie),可以(yi)在(zai)目(mu)鏡筒上進(jin)行直接(jie)觀(guan)(guan)察,還能在(zai)電(dian)腦(nao)計(ji)算機(ji)(數碼相機(ji))等顯示設備(bei)實時進(jin)行觀(guan)(guan)察,可以(yi)方便(bian)的將觀(guan)(guan)察畫面及動態視頻進(jin)行保(bao)存和打(da)印。
其攝影(ying)技術(shu)對于(yu)記(ji)(ji)錄(lu)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)圖像(xiang)十(shi)分重要,由于(yu)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)很易褪(tun)色減(jian)弱,要即(ji)(ji)時攝影(ying)記(ji)(ji)錄(lu)結果(guo)。方法與普通顯微攝影(ying)技術(shu)基本相同,只是需要采用高速感光(guang)(guang)(guang)膠片即(ji)(ji)可。因紫(zi)外光(guang)(guang)(guang)對熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)猝(cu)滅作(zuo)用大(da),如FITC的標記(ji)(ji)物(wu),在紫(zi)外光(guang)(guang)(guang)下(xia)(xia)照射30s,熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)亮度(du)(du)降低50%。所以,曝(pu)光(guang)(guang)(guang)速度(du)(du)太(tai)慢,就不(bu)能將(jiang)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)(guang)圖像(xiang)拍攝下(xia)(xia)來。
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