熒(ying)光顯微鏡(jing)是一種對(dui)物質進(jin)行(xing)定(ding)(ding)(ding)性和定(ding)(ding)(ding)量研究(jiu)的(de)工具,通過將紫外線照射在被(bei)檢測物體,使(shi)物體發出熒光從而實現對(dui)物質細胞內的(de)吸收、運輸(shu)、化學物質的(de)分布及定(ding)(ding)(ding)位的(de)研究(jiu)。
熒光顯微(wei)鏡的(de)使用方法如下:
①開啟熒光顯微鏡:白天用窗簾遮蔽光線,如果是夜間關閉房內光源,除去熒光顯微鏡防塵罩,裝上汞燈,插上熒光顯微鏡電源,打開燈源,預熱15分鐘使光源達到很亮。
②調(diao)節(jie)標本(ben)位(wei)置:將載(zai)玻(bo)片(pian)(pian)放(fang)置在(zai)載(zai)物臺并壓緊載(zai)玻(bo)片(pian)(pian),上升載(zai)物臺,調(diao)節(jie)載(zai)物臺調(diao)整按鈕,使標本(ben)在(zai)視野中央(yang)。
③選擇物鏡(jing)矯正畫面清晰(xi)度(du):按照先低倍再高倍的原則選擇,調節熒光顯(xian)微鏡右下方的旋鈕調整光源亮度,調節“粗調”與“微調”矯(jiao)正畫面(mian)的清晰度。
④選(xuan)擇熒光(guang)片(pian)調節曝光(guang)時間:選(xuan)擇合適的濾光(guang)片(pian),打開(kai)熒光(guang)光(guang)閘,調節曝光(guang)時間,對樣(yang)品進(jin)行觀(guan)察。
⑤拍照:將濾光片撤回,打開(kai)IPP系統拍照,選擇照片保存路徑并重(zhong)命名(ming),注意如(ru)果不調整(zheng)路徑和(he)重(zhong)命名(ming),會覆(fu)蓋之前的照片,關閉IPP系統與電腦。
⑥關閉(bi)汞燈:汞燈工作時(shi)(shi)(shi)間要在半(ban)小(xiao)時(shi)(shi)(shi)到兩(liang)個小(xiao)時(shi)(shi)(shi)之間,汞燈關閉(bi)半(ban)小(xiao)時(shi)(shi)(shi)后方(fang)可啟(qi)動。
⑦收好熒光顯微鏡(jing):向下輕壓載物臺將其鎖在很低處,取下載玻片,使用空物鏡朝下,關閉電源,將熒光顯微鏡用防塵罩蓋好。
使用熒(ying)光(guang)顯微鏡要注意哪些?
①嚴格按照說明書使用,不要對熒光顯微鏡隨意操作。使用熒(ying)光顯微鏡(jing)前后要登記儀器狀況。
②初(chu)次使(shi)用(yong)熒光顯微鏡(jing)要在(zai)熟悉操作流程的(de)人員指(zhi)導下(xia)使(shi)用(yong)。
③使用熒光顯微鏡應該在暗室環境,觀察標本時要確認眼睛完全適應暗室再進行觀察。
④觀(guan)察樣本時要戴(dai)上護目鏡,防止紫外線刺傷眼睛(jing)。
⑤使用(yong)油鏡(jing)時要(yao)注意(yi)操作規范(fan),避免(mian)油滴到載物臺或(huo)者其(qi)他(ta)鏡(jing)頭上,后要(yao)用(yong)二(er)甲苯擦拭鏡(jing)頭。
⑥熒光顯微鏡的光源使用壽命有限,觀察標本時要集中觀察,避免頻繁啟動熒光顯微鏡影響使用壽命。
⑦室內溫度高時,要對熒光顯微鏡加風(feng)扇或是(shi)空(kong)調降溫。
⑧新更換的燈泡要記錄使用時間,避(bi)免每天(tian)內(nei)燈泡頻繁(fan)啟動。
⑨標(biao)本染色后(hou)要立即觀察,時間久了(le)熒(ying)光會減弱,如果需要放(fang)置后(hou)檢(jian)查,要用聚乙烯(xi)塑料袋(dai)保存染色樣(yang)本。