熒光顯微鏡是指將紫外線作為光源，使(shi)(shi)其照射(she)在樣(yang)(yang)品(pin)上，并使(shi)(shi)得樣(yang)(yang)品(pin)發光，從而實現(xian)觀(guan)察的(de)一種(zhong)顯(xian)微鏡，用(yong)于生物領域中(zhong)研究細(xi)胞內物質(zhi)的(de)吸收、運輸、化學物質(zhi)的(de)分布及定位等的(de)工具。

熒光顯微(wei)鏡有兩(liang)個關鍵的(de)概念，其(qi)一是(shi)放大倍數，其(qi)二是(shi)分辨(bian)率。

熒光顯微鏡放大倍數在熒光顯微鏡的觀察應用中，為了獲得良好的結果，用戶需要對顯微鏡的放大倍數有一定的了解，顯微鏡的放大倍數就是指在我們在顯微鏡下觀察一個樣品時，成像之后比原本放大了多少。

而在熒光(guang)顯微鏡(jing)中，分辨率剛好與其相反，實際意義上的分辨率指的是樣品成像之后，圖片能夠呈現出樣品的多少細節，這可能是主觀的，在技術層面上，分辨率受到光的折射特性的限制。

熒光顯(xian)微鏡還有(you)一(yi)個(ge)概念是(shi)(shi)級限分(fen)辨(bian)(bian)率，它指典型的(de)(de)(de)落射(she)熒光照明(ming)復合(he)顯(xian)微鏡(jing)無法分(fen)辨(bian)(bian)或區分(fen)距(ju)離(li)小于200nm的(de)(de)(de)兩個(ge)物(wu)體。此外，因為整個(ge)樣品被同時照射(she)，所以樣品中所有(you)聚(ju)焦和離(li)焦的(de)(de)(de)光線都被檢測到(dao)。這些限制(zhi)意味著，根據物(wu)鏡(jing)中的(de)(de)(de)鏡(jing)片，可能能夠確(que)定(ding)一(yi)個(ge)細胞中的(de)(de)(de)兩個(ge)不同顏(yan)色的(de)(de)(de)探針，但是(shi)(shi)如果沒有(you)很多對照、單像素(su)分(fen)析(xi)和計算，就(jiu)無法分(fen)辨(bian)(bian)它們(men)之間(jian)的(de)(de)(de)空(kong)間(jian)關(guan)系。

熒光顯微放大倍數(shu)與標尺之(zhi)間的(de)對應關系

50x標尺每一格代(dai)表20μm

100x標(biao)尺每一格代表10μm

200x標尺每一格(ge)代表5μm

400x標尺每一格代(dai)表2.5μm

500x標尺每一格代表2μm

1000x標尺每一(yi)格代表(biao)1μm

熒光(guang)顯微(wei)鏡的物(wu)(wu)(wu)鏡(jing)放大倍(bei)(bei)數允(yun)許(xu)有(you)5%的誤差，所(suo)以使用前需要(yao)校準(zhun)，步(bu)驟(zou)是：把物(wu)(wu)(wu)鏡(jing)測微尺(chi)（劃分(fen)為(wei)100小(xiao)格(ge)(ge)，0.01mm/格(ge)(ge)）放在(zai)載(zai)物(wu)(wu)(wu)臺上，然后用相(xiang)應倍(bei)(bei)率(lv)的物(wu)(wu)(wu)鏡(jing)和10*刻(ke)(ke)度(du)目(mu)鏡(jing)（內有(you)0.1mm格(ge)(ge)值的刻(ke)(ke)度(du)尺(chi)）調焦成(cheng)象后，進行觀(guan)察，物(wu)(wu)(wu)鏡(jing)測微尺(chi)與目(mu)鏡(jing)刻(ke)(ke)度(du)尺(chi)重合的格(ge)(ge)數*0.01/目(mu)鏡(jing)刻(ke)(ke)度(du)尺(chi)的格(ge)(ge)數即(ji)為(wei)物(wu)(wu)(wu)鏡(jing)在(zai)此(ci)倍(bei)(bei)率(lv)下每個刻(ke)(ke)度(du)值的實際長度(du)。

物(wu)鏡(jing)和(he)目(mu)(mu)鏡(jing)加在一起標(biao)定總(zong)放大倍(bei)數(shu)。用(yong)物(wu)鏡(jing)測微尺當試樣看(kan)，上面(mian)有(you)個1mm的(de)尺子，分成(cheng)100個小(xiao)(xiao)格，一個小(xiao)(xiao)格是(shi)10微米。你(ni)用(yong)帶有(you)目(mu)(mu)鏡(jing)測微尺的(de)目(mu)(mu)鏡(jing)去量(liang)(liang)(liang)(liang)上面(mian)標(biao)尺的(de)長度(du)，量(liang)(liang)(liang)(liang)出來數(shu)值，除以1mm真實長度(du)，不(bu)就知道放大倍(bei)數(shu)了么。經常有(you)單位(wei)說(shuo)顯(xian)(xian)微鏡(jing)要讓計量(liang)(liang)(liang)(liang)局來計量(liang)(liang)(liang)(liang)。其實顯(xian)(xian)微鏡(jing)是(shi)分析儀(yi)器(qi)，不(bu)是(shi)強檢儀(yi)器(qi)。有(you)時計量(liang)(liang)(liang)(liang)局來人計量(liang)(liang)(liang)(liang)，主要就是(shi)干這個活，計量(liang)(liang)(liang)(liang)你(ni)的(de)放大倍(bei)數(shu)是(shi)不(bu)是(shi)在誤(wu)差(cha)之(zhi)內。